微生物染色技術(shù)
微生物細(xì)胞個體微小、透明且含水量高(一般為80%~90%),微生物細(xì)胞懸浮于水溶液中時,其對光線的吸收和反射與水溶液差別不大,
與周圍背景沒有明顯的明暗差,因此。難于看清其形態(tài).更談不上識別其細(xì)微結(jié)構(gòu)。所以.微生物細(xì)胞需要經(jīng)過染色后,借助染料的反襯才能
把菌體和背景區(qū)分開,從而能在顯微鏡下進行觀察。微生物學(xué)發(fā)展到現(xiàn)在,已形成很多染色技術(shù),這些技術(shù)除能對菌體染色外,還能對細(xì)胞內(nèi)
部或外部的細(xì)微結(jié)構(gòu)進行染色,染色技術(shù)已成為微生物學(xué)實驗中的較基本技術(shù)之一。
染色的基本原理
微生物染色的基本原理是根據(jù)微生物菌體和染料的特性,通過物理(細(xì)胞和細(xì)胞物質(zhì)對染料的毛細(xì)管現(xiàn)象、滲透作用和吸附作用等)和化學(xué)
因素(細(xì)胞物質(zhì)和染料的化學(xué)性質(zhì)不同而發(fā)生各種各樣的化學(xué)反應(yīng))的相互作用來實現(xiàn)的。酸性物質(zhì)對于堿性染料吸附力較強.吸附作用穩(wěn)固,
如酸性的胞核對于堿性染料就易于吸附;同理,堿性物質(zhì)吸附酸性染料能力強。如果要使酸性物質(zhì)染上酸性材料.必須改變它們的物理狀態(tài)(
比如細(xì)胞的pH)才利于吸附作用;反之,堿性物質(zhì)(如細(xì)胞質(zhì))通常僅能染上酸性染料,若把它們變?yōu)檫m宜的物理形式,也同樣能與堿性染料發(fā)
生吸附作用。
細(xì)菌的等電點較低,pH為2~5,而目前常用的培養(yǎng)基一般為中性、堿性或弱酸性。微生物在這些培養(yǎng)基中生長后菌體蛋白質(zhì)電離后帶負(fù)電
荷,而堿性染料電離時染料離子帶正電荷.帶負(fù)電荷的細(xì)菌常和帶正電荷的堿性染料進行結(jié)合。因此,在細(xì)菌學(xué)上常用堿性染料對細(xì)菌菌體進
行染色。